(1)培養(yǎng)基的制備

　　覆有石蠟的液體培養(yǎng)基，在滅菌之前，應(yīng)將液體石蠟包裹起來;流體培養(yǎng)基或半固體培養(yǎng)基在有氧條件下培養(yǎng)厭氧菌時(shí)，可用沸水浴或其它除氧方法將溶解的氧氣排出。

　　(2)操作過程

　　由于氧氣對(duì)厭氧菌有毒，整個(gè)操作過程應(yīng)在專用無氧設(shè)備中進(jìn)行。如果在正常空氣中操作，從厭氧菌暴露在空氣中到厭氧環(huán)境培養(yǎng)結(jié)束，整個(gè)過程應(yīng)盡可能快，一般不超過15分鐘，暴露時(shí)間越長(zhǎng)，厭氧菌越容易死亡。

　　(3)培養(yǎng)環(huán)境

　　厭氧環(huán)境可以通過厭氧罐、厭氧培養(yǎng)箱、厭氧氣包等方式提供。除了保證氣體環(huán)境無氧外，一些厭氧菌通常需要5%-10%的二氧化碳、氫等氣體來促進(jìn)生長(zhǎng)，提高厭氧菌對(duì)氧氣的耐受性，更容易成功培養(yǎng)。